Електрофорез у гелі ДНК: аналіз генетичних фрагментів

Електрофорез у гелі ДНК — це поширений метод молекулярної біології, який використовується для розділення та аналізу фрагментів ДНК на основі їх розмірів. Процес передбачає завантаження фрагментів ДНК різного розміру на гель з агарози, вуглеводу, який міститься в червоних водоростях.

Приготування та відливання агарозного гелю

  1. Розчиніть агарозу у відповідній кількості буфера для електрофорезу. Концентрація гелю визначається співвідношенням маси до об’єму, наприклад, 1 г агарози на 100ml буфера для 1% гелю.
  2. Нагрійте суміш у мікрохвильовій печі, обертаючи ємність до повного розчинення агарози.
  3. До розчину гелю додайте бромістий етидій до кінцевої концентрації 0,5мг/ ml. Бромід етідію вставляється між сусідніми парами основ ДНК і випромінює помаранчеву флуоресценцію під ультрафіолетовим світлом. Зауважте, що бромід етидію є канцерогеном, тому поводження з ним вимагає належних заходів безпеки, наприклад використання рукавичок.
  4. Охолодіть розчин гелю на водяній бані, щоб запобігти деформації лотка з гелем під дією високих температур.
  5. Помістіть гребінець у розчин гелю, щоб сформувати лунки для зразків. Виберіть гребінці, які підходять для кількості зразка ДНК, який ви завантажуєте. Налийте розчин агарозного гелю влоток для гелюі дайте йому застигнути при кімнатній температурі.
  6. Коли гель застигне, зніміть гребінець. Якщо ви не збираєтеся використовувати гель негайно, загорніть його в поліетиленову плівку та зберігайте при 4 ℃, поки не знадобиться.

Приготування та запуск гелю

Перед початком електрофорезу змішайте зразок ДНК із завантажувальним буфером. Завантажувальний буфер зазвичай у шість разів більш концентрований і допомагає зразку опускатися на дно лунок і відстежувати рух під час електрофорезу.

Встановіть джерело живлення на вказану напругу.

Додайте достатньо буфера для електрофорезу в резервуар для гелю, щоб покрити поверхню гелю.Забезпечитиправильне підключення електродів.

Завантажте зразок ДНК і маркери молекулярної маси в гелеві лунки.

Увімкніть джерело живлення, щоб розпочати електрофорез.

Спостереження розділених фрагментів ДНК

Після електрофорезу вимкніть живлення і видаліть гель.

Використовуйте джерело ультрафіолетового світла для освітлення гелю; Фрагменти ДНК виглядатимуть як помаранчеві флуоресцентні смуги.

Задокументуйте зображення гелю для аналізу розділених фрагментів ДНК.

Після експерименту переконайтесь у належній утилізації гелю та буфера для електрофорезу, дотримуючись інструкцій лабораторії. Завжди надягайте рукавички під час роботи з гелями та буферами, що містять бромід етидію, щоб захиститися від впливу цієї небезпечної речовини.

ДНК-гель-електрофорез широко використовується в молекулярній біології та генетичних дослідженнях для оцінки розмірів молекули ДНК, розділення фрагментів ДНК, виявлення генних мутацій і відбитків ДНК, серед інших застосувань. Це простий і ефективний експериментальний метод, який допомагає зрозуміти склад і характеристики зразків ДНК.

Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, професійний виробник продуктів для електрофорезу понад 50 років, пропонує низку резервуарів для електрофорезу (камер/комірок) для гель-електрофорезу, таких як резервуари для горизонтального електрофорезу (камери/комірки) дляДНКелектрофорез у гелі та вертикальні резервуари для електрофорезу (камери/комірки) для електрофорезу білкового гелю. Крім того, він також забезпечує різні типи джерел живлення для електрофорезу, кабінетний темний аналізатор та ультрафіолетовий трансілюмінатор. Ви можете вибрати резервуари для електрофорезу Beijing Liuyi (камери/клітини) для вимірювання молекулярної маси РНК і розділення РНК різних розмірів для вашої лабораторії.

Ось і будеморекомендуюодин тип горизонтальної моделі резервуара для електрофорезу (камера/комірка).DYCP-31DN для виготовлення та запуску гелю.

1

Після запуску гелю ви можете використовувати нашу модель системи аналізу й зображення гелюWD-9413Bспостерігати, аналізувати та робити знімки для гелю. Liuyi Biotech також пропонує УФ-трансілюмінатор (УФ-аналізатор) для спостереження за гелем. Ми маємо модель ультрафіолетового трансілюмінатора (УФ-аналізатор) типу чорної скринькиWD-9403A,9403C,WD-9403F, портативна модель УФ-трансілюмінатора (УФ-аналізатора).WD-9403Bі ручний УФ-трансілюмінатор (УФ-аналізатор)WD-9403Eна ваш вибір.

2

Бренд Beijing Liuyi має більш ніж 50-річну історію в Китаї, і компанія може надавати стабільні та високоякісні продукти по всьому світу. Завдяки рокам розвитку, він гідний вашого вибору!

Зараз ми шукаємо партнерів, вітаємо як резервуар для електрофорезу OEM, так і дистриб’юторів.

Якщо у вас є будь-який план придбання наших продуктів, будь ласка, не соромтеся зв’язатися з нами. Ви можете надіслати нам повідомлення на електронну пошту[електронна пошта захищена]або[електронна пошта захищена], або зателефонуйте нам за номером +86 15810650221 або додайте Whatsapp +86 15810650221 або Wechat: 15810650221.


Час публікації: 8 серпня 2023 р