Приготування агарозного гелю для електрофорезу

Приготування агарозного гелю для електрофорезу

Примітка: завжди надягайте одноразові рукавички!

Покрокові інструкції

Зважування агарозного порошку:uвикористовуйте папір для зважування та електронні ваги для вимірювання 0,3 г порошку агарози (на основі 30 мл системи).

Підготовка буфера TBST:pвідновіть 30 мл буфера 1x TBST у колбі Ерленмейера на 100 мл.

Розчинення агарозного порошку:pпомістіть порошок агарози в буфер TBST і добре струсіть.Помістіть їхдо мікрохвильової печі та нагрівайте (зазвичай протягом 50 секунд, накривши алюмінієвою фольгою) до повного розчинення.

Охолодження та додавання нуклеази:uв рукавичках вийміть суміш з мікрохвильової печі та дайте їй трохи охолонути в холодній воді, поки вона не стане теплою (приблизно 60°C). Додайте 2 мкл нуклеази (замінник Eb), струшуючи, щоб ретельно перемішати.

Підготовка гелевої форми:

• Cзмийте і висушітьлоток для гелю та пристрій для лиття гелюємності для електрофорезу.
•  Pзашнурувати гельлотоку внутрішній резервуар і вставте гребінець у фіксоване положення.
• Змішайте розчин агарозного гелю, охолоджений приблизно до 65°C, і обережно вилийте його налоток для гелювпристрій для лиття гелю, повільно розподіляючи, доки він не утворить рівномірний шар гелю на скляній пластині.
• Дайте йому постояти при кімнатній температурі, поки гель повністю не застигне.
• Обережно зніміть гребінець вертикально та зніміть стрічку.
• Покладіть гельлотокв резервуар для електрофорезу.

Важливо: переконайтеся, що в області зубців гребінця немає бульбашок повітря. Поверхня рідини повинна бути гладкою без брижів.

Запуск гелю

Завантаження гелю

Після того як гель затвердіє, помістіть його в резервуар для електрофорезу та залийте буфером для електрофорезу, доки гель не зануриться.

Підготовка зразків

• Візьміть маркер і завантажувальний буфер із холодильника.
• Додайте 6 мкл завантажувального буфера до зразків і добре перемішайте.
• За допомогою мікропіпетки повільно завантажте зразки у великі лунки гелю (будьте обережні, щоб не проколоти гель і не розподіляти весь об’єм, щоб уникнути бульбашок повітря).
• Завантажте маркер в будь-яку з маленьких лунок (запам'ятайте його положення).

Початок електрофорезу

• Накрийте резервуар для електрофорезу та починайте електрофорез одразу після завантаження гелю.
• Виставте напругу 60-100В. Зразки будуть мігрувати від негативного електрода (чорний) до позитивного електрода (червоний).
• Вища напруга скорочує ефективний діапазон поділу агарозного гелю.
• Припиніть електрофорез, коли барвник бромфеноловий синій досягне приблизно 1 см від нижнього краю гелевої пластини.

Спостереження за результатами

Після розділення смуг припиніть електрофорез, вийміть гель і безпосередньо виявіть і сфотографуйте його.

Використовуйте гелеву систему візуалізації, щоб сфотографувати та спостерігати за смугами (перевірте, чи є смуги для маркера чи зразків).

Отримавши карту гелевої стрічки, знайдіть маркер. За маркером можна визначити цільові смуги!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) виробляє продукти для електрофорезу більше 50 років. Ми представляємо тут наші системи горизонтального електрофорезу дляагарозний гельелектрофорез.Виберітьсистеми горизонтального електрофорезуз Пекіна Люї за ваш експеримент з електрофорезу в гелі, який допоможе вашим дослідженням у біотехнологічній галузі.

Ми пропонуємо різні моделі резервуарів для горизонтального електрофорезу для лиття та малого ходуагарознийгелі до великогоагарознийгелі

Посібник з вибору установки для горизонтального зануреного гель-електрофорезу

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) більше 50 років спеціалізується на виробництві інструментів для електрофорезу з нашою власною професійною технічною командою та науково-дослідним центром. Ми маємо надійну та повну виробничу лінію від проектування до перевірки, склад, а також маркетингову підтримку. Нашою основною продукцією є комірка для електрофорезу (резервуар/камера), джерело живлення для електрофорезу, синій світлодіодний трансілюмінатор, УФ-трансілюмінатор, система гелевого зображення та аналізу тощо. Ми також постачаємо лабораторні інструменти, такі як інструмент ПЛР, вихровий змішувач і центрифуга для лабораторії.

Якщо у вас є будь-який план придбання наших продуктів, будь ласка, не соромтеся зв’язатися з нами. Ви можете надіслати нам повідомлення на електронну пошту[електронна пошта захищена]або[електронна пошта захищена], або зателефонуйте нам за номером +86 15810650221 або додайте Whatsapp +86 15810650221 або Wechat: 15810650221.

Відскануйте QR-код, щоб додати його в Whatsapp або WeChat.