Гель-електрофорез є одним з основних методів, що використовуються в молекулярній біології для аналізу ДНК.Цей метод передбачає міграцію фрагментів ДНК через гель, де вони розділяються за розміром або формою.Однак чи траплялися у вас будь-які помилки під час експериментів з електрофорезу, наприклад, змащені смуги на агарозному гелі або відсутність смужок на гелі?Що може бути причиною цих помилок?
Наші технічні спеціалісти узагальнили кілька способів усунення несправностей тут для вашої довідки.
1. Намазані смуги на агарозному гелі
●ДНК була деградована.Уникайте забруднення нуклеазою.
● Буфер для електрофорезу не свіжий.Після повторного використання буфера для електрофорезу іонна сила знижується, а значення його рН підвищується, тому буферна ємність послаблюється, що позначається на ефекті електрофорезу.Рекомендується часто замінювати буфер для електрофорезу.
● Використовувалися невідповідні умови електрофорезу.Не допускайте перевищення напруги 20 В/см і підтримуйте температуру <30°C під час електрофорезу.Для електрофорезу гігантських ланцюгів ДНК температура має бути <15°C. Перевірте, чи буфер для електрофорезу має достатню буферну ємність.
● На гель завантажено забагато ДНК.Зменшити кількість ДНК.
● Забагато солі в ДНК.Використовуйте осадження етанолом для видалення надлишкових солей у розширеному режимі.
● ДНК була забруднена білком.Використовуйте фенольні екстракції для видалення білка на передовій основі.
● ДНК була денатурована.Не нагрівайте перед електрофорезом.Розведіть ДНК у буфері з 20 мМ NaCl.
2. Аномалії міграції смуг ДНК
● Ренатурація сайту COS фрагмента λHind III.Нагрійте ДНК протягом 5 хвилин до 65°C перед електрофорезом, а потім охолодіть її на льоду протягом 5 хвилин.
● Використовувалися невідповідні умови електрофорезу.Не допускайте перевищення напруги 20 В/см і підтримуйте температуру <30°C під час електрофорезу.Перевірте, чи достатньо буфера для електрофорезу.
● ДНК була денатурована.Не нагрівайте перед електрофорезом.Розведіть ДНК у буфері з 20 мМ NaCl.
3. Слабкі або відсутні смуги ДНК на агарозному гелі
● На гель було завантажено недостатню кількість або концентрацію ДНК.Збільшити кількість ДНК.Електрофорез у поліакриламідному гелі дещо більш чутливий, ніж електрофорез у агарозі, і завантаження зразка можна відповідно зменшити.
● ДНК деградувала.Уникайте забруднення нуклеазою.
● ДНК піддали електрофорезу з гелю.Виконуйте електрофорез гелю протягом меншого часу, використовуйте нижчу напругу або використовуйте вищий відсоток гелю.
● Для візуалізації ДНК, пофарбованої бромістим етидієм, було використано невідповідне джерело світла W.Використовуйте короткохвильове світло (254 нм) W для більшої чутливості.
4. Відсутні смуги ДНК
●ДНК невеликого розміру знімали з гелю за допомогою електрофорезу.Виконуйте електрофорез гелю протягом меншого часу, використовуйте нижчу напругу або використовуйте вищий відсоток гелю.
● Важко розрізнити смуги ДНК подібної молекули.Збільште час електрофорезу та перевірте концентраціюгелю, щоб переконатися, що відсоток гелю буде використаний правильно.
● ДНК була денатурована.Не нагрівайте перед електрофорезом.Розведіть ДНК у буфері з 20 мМ NaCl.
● Нитки ДНК величезні, і звичайний електрофорез у гелі не підходить.Аналіз за допомогою імпульсного гель-електрофорезу.Які інші проблеми у вас виникли під час електрофорезу в агарозному гелі?У майбутньому ми будемо шукати більше гідів.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) є спеціалізованою компанією, що спеціалізується на продуктах, пов’язаних з електрофорезом, у Китаї.Його історія починається в 1970 році, коли Китай ще не вступив у реформи та час відкриття.Завдяки багаторічному розвитку Liuyi Bitotech має власний бренд, який відомий як Liuyi Brand на внутрішньому ринку продуктів для електрофорезу.
Бренд Liuyi має більш ніж 50-річну історію в Китаї, і компанія може надавати стабільні та високоякісні продукти по всьому світу.Завдяки рокам розвитку, він гідний вашого вибору!
Осередки горизонтального електрофорезу (резервуари/камери) Liuyi Biotech відрізняються високою якістю та гарним зовнішнім виглядом.Завдяки різним розмірам лотків для гелю вони можуть задовольнити різні експериментальні вимоги.У нас є власна технічна команда та фабрика.Ми можемо контролювати весь процес: від проектування до виробництва, від сировини до ключових частин.Серія DYCP 31 призначена для електрофорезу ДНК, який є моделлюDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, іDYCP-31E.Відмінності між ними полягають у розмірі гелю та ціні.Ми надаємо повні розміри продукції для наших клієнтів.МодельDYCP-32Cможе зробити найбільший гель 250 мм * 250 мм.
Тим часом ми рекомендуємо наш блок живлення для електрофорезуDYY-6C,DYY-6DіDYY-10Cдля наших камер електрофорезу (резервуарів/камер) серій DYCP-31 і 32.
Якщо вам потрібна додаткова інформація про продукти, будь ласка, відвідайте цей веб-сайт, щоб отримати більше, і зв’яжіться з нами електронною поштою, щоб повідомити нам, що ви хочете, і перевірити, чи можемо ми надати вам рішення.
Для отримання додаткової інформації про нас, будь ласка, зв'яжіться з нами електронною поштою[електронна пошта захищена], [електронна пошта захищена].
Час публікації: травень-09-2022